蛋白純化通用問(wèn)題（二）

那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下蛋白純化通用問(wèn)題（二）。


7、填料如何儲(chǔ)存？
答：請(qǐng)參考說(shuō)明書(shū)。大部分填料可以在 4-40℃ 儲(chǔ)存，不可以冷凍，注意北方的冬天有時(shí)候室溫低于零度，運(yùn)輸和儲(chǔ)存應(yīng)避免凍住。儲(chǔ)存過(guò)程中，注意避免填料干掉，或低溫產(chǎn)生氣泡。
儲(chǔ)存液 ：對(duì)于耐堿的層析介質(zhì)，可以使用 0.01M NaOH 作為儲(chǔ)存液 ；對(duì)于不耐堿比如親和介質(zhì)，一般是用 20% 的乙醇或 2% 苯甲醇作為儲(chǔ)存試劑。


8、樣品與緩沖液怎么脫氣和過(guò)濾？
答:溶液和樣品必須過(guò)濾（0.2um或者0.45um的濾膜過(guò)濾）和脫氣，可以使用負(fù)壓抽濾瓶過(guò)濾，并且在負(fù)壓條件下保持10min脫氣。脫氣的方法還包括：超聲15min以上或者使用注射用水配制緩沖液。對(duì)于小體積樣品的過(guò)濾，可以使用高速離心的方式，吸取上清。


9、AKTA系統(tǒng)的清洗和保存？
答:按時(shí)清洗系統(tǒng)或遇到問(wèn)題時(shí)清洗系統(tǒng)。用1M NaOH ，小流速清洗系統(tǒng)30min，之后立即用0.5M NaCl和去離子水將NaOH沖洗干凈并且系統(tǒng)pH保持在中性。系統(tǒng)長(zhǎng)時(shí)間不使用，需保存在20%乙醇中。


10、如何進(jìn)行柱前壓校準(zhǔn)？
答:取決于柱位閥，斷開(kāi)所有流路，在system control-system-calibration-歸零。


11、AKTA pure與prime plus的*大耐受壓力？
答:pure 25是20Mpa，pure 150是5Mpa；prime plus 是1Mpa；紫外電導(dǎo)2MPa，PH電極耐壓0.5MPa。


12、如何設(shè)置報(bào)警壓力？
答：
系統(tǒng)配有多柱位閥：
可以檢測(cè)柱子的柱前Pre C壓力，柱后Post C壓力，并且計(jì)算出Delta C壓力。
分別設(shè)置Pre Column Pressure和Delta Column Pressure的壓力報(bào)警保護(hù)柱子。

系統(tǒng)無(wú)多柱位閥：
先用管道代替柱子連接設(shè)備，在工作流速下測(cè)定系統(tǒng)本身的壓力，此為空載壓力。
Pre Column Pressure為Max Pre-Column Pressure和Max Delta Column Pressure+空載壓力中較低值。


13、在正確設(shè)置了報(bào)警壓后，層析柱接入AKTA，總是超壓報(bào)警？
答：首先判斷AKTA系統(tǒng)是否本身壓力過(guò)高，在線濾膜或者反壓閥堵塞，正常情況下反壓閥空跑系統(tǒng)壓力為0.2左右。如果系統(tǒng)沒(méi)有問(wèn)題，接入柱子出現(xiàn)超壓，可能是柱子堵塞或者連接柱子的管線折彎造成超壓，調(diào)整連接管線或者按說(shuō)明書(shū)方式清洗層析柱。

以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于蛋白純化通用問(wèn)題（二）。
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