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效液相色譜儀的系統(tǒng)組成、工作原理

日期:2024-10-16 20:29
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摘要:
 效液相色譜儀般都具備貯液器、壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、恒溫器、記錄儀等主要部件。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較 效液相色譜,具有效、快速、靈敏等特點,效液相色譜以經(jīng)典的液相色譜為基礎(chǔ),是以壓下的液體為流動相的色譜過程。效液相色譜分析的流程如下:
效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。壓泵將儲液器中的流動相打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,溶解于流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi),因為樣品溶液中的各組分在固定相和流動相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運動時, 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。遇到復(fù)雜的混合物分離(性范圍比較寬)還可用梯度控制器作梯度洗脫。
效液相色譜的分離過程 HPLC,它借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離。
與經(jīng)典的液相色譜相比,具有效液相所用的固定相粒度小(5um-10um)、傳質(zhì)快、柱效的勢。近年來,在保健食品功效成分、營養(yǎng)強化劑、維生素類、蛋白質(zhì)的分離測定等應(yīng)用廣泛。上約有80%的有機化合物可以用HPLC來分析測定。
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