電泳的目的

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電泳是一種功能強(qiáng)大且便宜的分子分離技術(shù)。存在進(jìn)行電泳的各種原因，包括與分子的非侵入性結(jié)合和分子分離的可視化。總體而言，電泳的目的是提供一種分析物質(zhì)的準(zhǔn)確方法，例如您的血液和DNA（脫氧核糖核酸），這些物質(zhì)很難用常規(guī)方法分離。

定義

電泳是一種經(jīng)驗(yàn)技術(shù)，用于根據(jù)電流中的響應(yīng)分離諸如細(xì)胞和蛋白質(zhì)等帶電分子（正負(fù)）。

影響電泳的因素有很多，包括凈電荷，分子質(zhì)量，緩沖液和電泳介質(zhì)，如紙或凝膠。在電泳中，分子向相反的電荷移動(dòng)；例如，具有正凈電荷的蛋白質(zhì)會(huì)向電泳介質(zhì)的負(fù)極移動(dòng)。此外，質(zhì)量較小的分子比質(zhì)量較大的分子運(yùn)動(dòng)更快或分離更快。

分子結(jié)合

使用介質(zhì)的電泳有意以非侵入性方式與分子相互作用。例如，凝膠介質(zhì)與蛋白質(zhì)分子結(jié)合而不會(huì)破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能。與分子結(jié)合后，通過施加電流開始移動(dòng)或分離。此外，也可以在電泳后回收結(jié)合至培養(yǎng)基的分子。

高分辨率分離

電泳儀旨在可視化分子的分離。這可以通過各種方法來實(shí)現(xiàn)，包括染色和放射自顯影。

放射自顯影使用X射線膠片在分離后可視化放射性分子（例如DNA）的位置。這種類型的可視化效果可與拍照相媲美，其中X射線就像照相機(jī)閃光燈，而X射線膠片像是用于沖洗黑白照片的膠片。在電泳中，血液中的蛋白質(zhì)等分子的照片是使用放射自顯影技術(shù)顯影的。

在染色中，在分離過程之前或之后，將諸如考馬斯藍(lán)和酰胺黑的染料與分子混合。例如，在電泳前將蛋白質(zhì)與考馬斯染料混合會(huì)產(chǎn)生染色的路徑（小點(diǎn)或線），顯示蛋白質(zhì)在分離過程中的運(yùn)動(dòng)。

定量分析

電泳儀的另一個(gè)目的是在可視化分子分離后獲得定量信息。為了獲得定量數(shù)據(jù)，例如，圖像分析軟件（2D和3D渲染軟件）將電泳結(jié)果記錄為數(shù)字信號(hào)。這些信號(hào)代表分子在電泳之前和之后的位置，然后被用于“計(jì)算機(jī)”定量分析（使用計(jì)算機(jī)）。

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